Il materiale
- Il flacone di MOTS-c liofilizzato e i dati del suo lotto, con la quantità dichiarata in mg.
- Un solvente sterile adatto al protocollo: le schede dei fornitori indicano acqua batteriostatica o un diluente sterile.
- Siringhe e aghi sterili monouso, tamponi imbevuti di alcol.
- Etichette, pennarello indelebile e, se servono aliquote, provette sterili.
Le specifiche del prodotto (forma, purezza dichiarata, temperature) sono riportate nella scheda tecnica del MOTS-c liofilizzato del fornitore: conviene tenerle a portata di mano prima di iniziare.
La procedura in sette passi
- Portare il flacone a temperatura ambiente, ancora chiuso, per evitare condensa sulla polvere.
- Controllare il flacone: sigillo integro, polvere asciutta, numero di lotto leggibile.
- Disinfettare i tappi del flacone e del solvente con alcol e lasciare asciugare.
- Aspirare il volume di solvente scelto e annotarlo: è questo a fissare la concentrazione.
- Iniettare lentamente lungo la parete del flacone, senza dirigere il getto sulla polvere.
- Sciogliere con delicatezza, facendo ruotare il flacone tra le dita. Non agitare: la schiuma può danneggiare il peptide.
- Verificare ed etichettare: la soluzione deve essere limpida. Scrivere peptide, concentrazione, data e lotto, poi riporre subito al freddo.
Tabella delle concentrazioni
Concentrazione (mg/mL) = quantità nel flacone (mg) ÷ volume di solvente (mL)
| Flacone | Solvente | Concentrazione | mg in 0,1 mL |
|---|---|---|---|
| 10 mg | 1 mL | 10 mg/mL | 1 mg |
| 10 mg | 2 mL | 5 mg/mL | 0,5 mg |
| 10 mg | 5 mL | 2 mg/mL | 0,2 mg |
| 20 mg | 2 mL | 10 mg/mL | 1 mg |
| 20 mg | 4 mL | 5 mg/mL | 0,5 mg |
| 40 mg | 4 mL | 10 mg/mL | 1 mg |
| 40 mg | 8 mL | 5 mg/mL | 0,5 mg |
Più solvente significa una soluzione più diluita e frazioni più facili da misurare con precisione. La quantità reale di peptide, però, può essere inferiore a quella nominale: il concetto di contenuto netto è spiegato in qualità e analisi.
Errori frequenti
- Agitare il flacone per accelerare la dissoluzione.
- Non annotare il volume di solvente, rendendo la concentrazione sconosciuta.
- Usare solventi non sterili o aghi già usati.
- Lasciare la soluzione alla luce o a temperatura ambiente.
Per una panoramica valida per tutti i peptidi liofilizzati, con le differenze tra solventi, c’è anche la guida generale alla ricostituzione su it-peptides.it. Per il MOTS-c, una volta in soluzione, il passo successivo è la conservazione corretta.