Tre misure, tre domande
| Analisi | Risponde a | Cosa cercare |
|---|---|---|
| HPLC | Quanto è puro? | Un picco principale netto e la percentuale calcolata sull’area dei picchi |
| Spettrometria di massa (MS) | È proprio MOTS-c? | Una massa coerente con circa 2174,6 g/mol1 |
| Contenuto netto di peptide | Quanti mg ci sono nel flacone? | La quota di peptide rispetto ad acqua residua e controioni |
Purezza e contenuto netto non sono la stessa cosa
Un peptide sintetico liofilizzato contiene, oltre al peptide, acqua residua e controioni (spesso trifluoroacetato o acetato) provenienti dalla sintesi. Una purezza HPLC del 99% indica che il peptide è privo di impurezze simili, non che 10 mg di polvere contengano 10 mg di peptide. Per questo il calcolo delle concentrazioni nella pagina ricostituzione presuppone sempre la quantità dichiarata.
Il caso dell’ossidazione
Le due metionine del MOTS-c possono ossidarsi, producendo forme con una massa di 16 o 32 unità più alta. Uno spettro di massa ben fatto le rende visibili; non a caso il metodo antidoping pubblicato nel 2019 cerca anche questi prodotti di ossidazione.2
La checklist
- Il documento analitico riporta un numero di lotto e una data.
- È indicato il laboratorio che ha eseguito l’analisi.
- Ci sono i dati grezzi: cromatogramma HPLC e spettro di massa, non solo una percentuale.
- Sono indicati sequenza, numero CAS (1627580-64-6) e massa.
- La scheda del prodotto riporta lo stato “solo per la ricerca”, senza promesse di effetti.
- Le condizioni di conservazione sono indicate per polvere e soluzione.
Un consiglio. Se il laboratorio dispone di uno spettrometro, una verifica interna della massa su un campione del lotto è il controllo più semplice e convincente.
Fonti
- PubChem, scheda “Mots-c” (CID 146675088): formula, massa e sinonimi. pubchem.ncbi.nlm.nih.gov
- Knoop A. et al. Development of a mass spectrometry based detection method for the mitochondrion-derived peptide MOTS-c in plasma samples for doping control purposes. Rapid Communications in Mass Spectrometry, 2019. PubMed 30394592